EDQMs neue Referenzsubstanz für Hepatitis-C-Virus

Infektionen mit dem Hepatitis-C-Virus (HCV) stellen in Europa und weltweit ein großes Problem für die öffentliche Gesundheit dar. HCV ist ein umhülltes Positivstrang-RNA-Virus, das hauptsächlich parenteral durch den Austausch infizierter Spritzen zwischen Drogenkonsumenten oder durch Blut in Ländern übertragen wird, in denen nicht immer sichere medizinische Verfahren angewandt werden.

In Europa stehen seit vielen Jahren Nukleinsäureamplifikationstechniken (NAT) zum Screening auf virale Verunreinigungen in Blutderivaten zur Verfügung und werden derzeit weitgehend als Routineassays in der Blutproduktindustrie eingesetzt. NAT-Assays sind hochempfindlich und ermöglichen eine frühzeitige Erkennung von Infektionen in Zeitfenstern, in denen Antikörperspiegel im Plasma kontaminierter Personen nicht nachweisbar sind. So tragen sie dazu bei, die Sicherheit von Bluttransfusionen zu erhöhen und die Verbreitung viraler Kontaminationen unter den Transfusionsempfängern zu verringern. Die Monographien Humanplasma zur Fraktionierung (0853) und Humanplasma (zur Virusinaktivierung behandelt) (1646) des Europäischen Arzneibuchs (Ph. Eur.) schreiben vor, dass Plasmapools mittels validierter NAT auf HCV-RNA getestet werden. Zu diesem Zweck wurde 1999 die HCV-RNA für NAT-Tests der BRP-Charge 1 als Positivkontrolle eingeführt.

Nun sind Bestände dieses Referenzpräparats fast erschöpft, weshalb das European Directorate for the Quality of Medicines &HealthCare (EDQM) unter der Kontrolle des Biologischen Standardisierungsprogramms (Biological Standardisation Programme - BSP) ein Projekt mit dem Code BSP158 initiierte, um eine Ersatzcharge BRP-Charge 2 herzustellen. Die Biologische Referenzzubereitung (Biological Reference Preparation - BRP) wird von Herstellern und amtlichen Arzneimittelkontrolllabors als Arbeitsstandard für Routinetests von Plasmapools verwendet. Fünfzehn Laboratorien aus Europa und darüber hinaus nahmen an der gemeinsamen Studie zur Kalibrierung der Ersatzcharge teil. In dieser Studie wurden verschiedene NAT-basierte Assays verwendet, um die Eignung des Kandidatenmaterials als Ersatz für die aktuelle BRP (Charge 1) zu bewerten. Der Kandidat wurde aus einer HCV-RNA-positiven Plasmaspende im Fensterzeitraum hergestellt und in defibriniertem Normalplasma verdünnt. Die Präqualifikationstests ergaben, dass die Charge in Bezug auf Füllgewicht und Wirksamkeit homogen war und dass die Restfeuchte und der Sauerstoffgehalt für eine Langzeitlagerung geeignet waren. Die Studie hat gezeigt, dass die BRP für den vorgesehenen Zweck geeignet ist, d. h. nach Verdünnung als Positivkontrolle gemäß den Spezifikationen der einschlägigen Ph.Eur.-Monographien verwendbar ist.

Abschließende Stabilitätsstudien zum beschleunigten Abbau haben gezeigt, dass das Material bei der vorgesehenen Langzeitlagerungstemperatur, d. h. bei - 20 °C, eine zufriedenstellende Stabilität aufweist. Die BRP wird jedoch während seiner gesamten Lebensdauer in regelmäßigen Abständen überwacht werden.

Die Charge 2 wird verteilt, sobald die Charge 1 aufgebraucht ist. Einzelheiten zur Verwendung werden in einer Begleitbroschüre angegeben, die zu gegebener Zeit auf der EDQM-Website zum kostenlosen Download zur Verfügung gestellt wird. Bis dahin finden Sie weitergehende Informationen im vollständigen EDQM-Artikel und im publizierten Paper "Establishment of Ph.Eur. Hepatitis C Virus RNA for NAT testing BRP batch 2".